Cytométrie en flux - Formation de base
Durée
3 jours, 21 heures
Modalité
Objectifs
Comprendre les principes fondamentaux de la cytométrie en flux
Analyser et interpréter les données obtenues par cytométrie en flux
Prérequis
Connaissances de base en Biologie cellulaire
Public cible
Techniciens, Cadres, Biologistes
Financement
- OPCO
- France Travail
Programme
Décrire le fonctionnement d'un cytomètre en flux
- Description de l'appareil :
- fluidique
- optique (source de lumière, séparation des lumières émises, détection)
- électronique (signal pic et intégral, amplification linéaire ou logarithmique, compensation de fluorescence, numérisation des signaux)
- informatique (analyse et stockage des données) - Choix du type de signal (pic ou intégral) et du mode d'amplification dans les applications telles que l'immunomarquage, l'analyse des fonctions cellulaires (phagocytose, changement de pH,...), cycle cellulaire, combinaisons des différentes applications
Identifier les différents fluorochromes
- Spectres d'excitation et d'émission, compensation de fluorescence
Analyser et stocker des données
- Histogramme mono et biparamétrique, valeurs statistiques
- Stockage et analyse en "Listmode"
Définir un protocole expérimental pour l'immunomarquage
- Choix des anticorps, contrôles, calibration des signaux, réglages du cytomètre
Identifier les problèmes de sécurité
- Risques biologiques liés à la manipulation d'échantillons et mesures de prévention (EPI, bonnes pratiques)
- Risques chimiques associés aux fluorochromes et aux solvants (toxicité, phototoxicité, élimination des déchets)
- Risques physiques : sécurité laser, pression des fluides, risques électriques
- Procédures de nettoyage, désinfection, décontamination et maintenance du cytomètre
- Réglementation applicable (biosécurité, sécurité laser), gestion des incidents et traçabilité
Méthodes pédagogiques
Alternance de méthodes pédagogiques variées, adaptées aux différentes compétences à acquérir. Des cours magistraux permettront aux stagiaires d'acquérir les connaissances théoriques nécessaires, tandis que des travaux pratiques leur permettront de se familiariser avec les techniques d'analyse et de diagnostic. Des études de cas seront également proposées, afin d'encourager les stagiaires à développer leur esprit d'analyse et de synthèse.
Modalités d'évaluation
Une évaluation formative sera réalisée tout au long du programme afin de permettre aux formateurs de fournir un retour régulier aux participants et de les aider à progresser dans leur apprentissage. Elle pourra prendre la forme d'exercices pratiques, de discussions de groupe ou de QCM.
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