PCR quantitative
Durée
2 jours, 14 heures
Modalité
Objectifs
Comprendre et appliquer les diverses techniques de quantification des acides nucléiques arn et adn par pcr en temps réel
Étudier et appliquer la technologie de la pcr en temps réel real-time pcr
Prérequis
Maîtrise des techniques de base en Biologie moléculaire Connaissances théoriques de la PCR
Public cible
Techniciens, Cadres, Biologistes
Financement
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Salariés
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Programme
Expliquer les principes de base de la pcr quantitative
- Comparaison de la PCR quantitative avec la PCR classique
- Principe de l'amplification spécifique et de la détection en temps réel
- Différents types de sondes utilisées en qPCR (sondes TaqMan, sondes SYBR Green, etc.)
Décrire les techniques de préparation des échantillons pour la qpcr
- Extraction et purification de l'ADN ou de l'ARN à partir de différents types d'échantillons biologiques
- Optimisation des paramètres d'extraction pour obtenir des résultats fiables
Réaliser la mise en place d'une réaction de qpcr
- Choix des amorces spécifiques et des sondes appropriées
- Optimisation des conditions de réaction, y compris la concentration en amorces et en sondes, les cycles de température, etc.
Interpréter les résultats de la qpcr et quantifier les cibles génétiques
- Analyse des courbes de fluorescence obtenues pendant la qPCR.
- Détermination des valeurs Ct (Cycle Threshold) et de l'expression relative des gènes.
Appliquer la qpcr dans des domaines spécifiques
- Utilisation de la qPCR pour la détection de pathogènes, l'analyse de l'expression génique, la quantification des copies génomiques, etc.
- Analyse des gènes d'intérêt dans des études de recherche spécifiques.
Optimiser la qualité des résultats de la qpcr et gérer les problèmes potentiels
- Contrôle de la qualité des amorces, des sondes et des réactifs
- Évaluation et résolution des problèmes courants, tels que la contamination, les inhibiteurs de PCR, etc.
Méthodes pédagogiques
Alternance de méthodes pédagogiques variées, adaptées aux différentes capacités à acquérir. Des cours magistraux permettront aux stagiaires d'acquérir les connaissances théoriques nécessaires, tandis que des travaux pratiques leur permettront de se familiariser avec les techniques d'analyse et de diagnostic. Des études de cas seront également proposées, afin d'encourager les stagiaires à développer leur esprit d'analyse et de synthèse.
Les parties théoriques se déroule en grand groupe d'apprenants. Les activités alternant entre cours magistraux
(méthode transmissive) ou de travaux dirigés sous forme d'étude de cas (méthode interrogative).
Des travaux pratiques (seul ou en petit groupe) avec le matériel adéquat (méthode active) permet de faire le
lien entre savoirs et savoir-faire pour permettre l'ancrage des nouvelles capacités professionnels.
Groupes composés d'environ 4 à 15 personnes
Modalités d'évaluation
Une évaluation formative sera réalisée tout au long du programme afin de permettre aux formateurs de fournir un retour régulier aux participants et de les aider à progresser dans leur apprentissage. Elle pourra prendre la forme d'exercices pratiques, de discussions de groupe ou de QCM.
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Avis et satisfaction
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