Quel est le prix de cette formation ?

Le tarif de la formation Cytologie et cytométrie en flux - Interaction dans la démarche menant au diagnostic des hémopathies est de 1 740,00 € HT. Des solutions de financement sont disponibles : OPCO, France Travail, DPC.

Comment se déroule cette formation ?

Cette formation est disponible en Présentiel. Nous proposons des sessions inter-entreprises dans nos centres de formation, ainsi que des sessions intra-entreprise dans vos locaux.

Hématologie & Immunologie

Cytologie et cytométrie en flux - Interaction dans la démarche menant au diagnostic des hémopathies

Référence

HEM.CF

• Mis à jour le 03 nov. 2025

Durée

3 jours, 21 heures

Modalité

Présentiel

Objectifs

Maîtriser les principes de la cytologie et de la cytométrie en flux dans le diagnostic des hémopathies

Appliquer les avancées technologiques en hématologie pour améliorer le diagnostic et l'évaluation pronostique des hémopathies

Utiliser efficacement la cytométrie en flux pour diagnostiquer les hémopathies myéloïdes et lymphoïdes et évaluer la maladie résiduelle

Prérequis

Pratique de la cytologie hématologique

Public cible

Technicien, Biologiste, Ingénieur, Chercheur

Financement

OPCO
France Travail

Programme

Reconnaître l'hématopoïèse et la cytologie normales

Lieux de l'hématopoïèse selon l'âge (moelle osseuse, foie foetal, etc.)
Étapes de différenciation des lignées myéloïde et lymphoïde
Identification morphologique des précurseurs (myéloblastes, promyélocytes...)
Cytologie des cellules matures (GR, plaquettes, polynucléaires, lymphocytes)
Différences de morphologie entre frottis sanguin et moelle
Aspect normal des noyaux, cytoplasmes, granulations, vacuoles

Identifier les principes fondamentaux de la cytologie et la cytométrie en flux

Rappel
Applications en hématologie

Identifier les principes généraux de la classification des hémopathies myéloides et lymphoïdes

Leucémies aiguës
Hémopathies lymphoïdes

Définir l'importance des marqueurs moléculaires et cytogénétiques dans le diagnostic et le suivi des hémopathies

Nouveaux marqueurs moléculaires et cytogénétiques
Utilisation dans le diagnostic et l'appréciation du pronostic des hémopathies

Déterminer l'importance de la détection de la maladie résiduelle

Techniques pour la détection de la maladie résiduelle
Dernières avancées technologiques
Utilisation de la biologie moléculaire et de la cytométrie en flux dans le suivi des hémopathies

Utiliser la cytométrie en flux pour le diagnostic et le suivi des hémopathies myéloïdes et lymphoïdes : application pratique 12

Leucémies aiguës
Hémopathies lymphoïdes

Définir les principes de fonctionnement d'un automate à nfs et d'un cytomètre en flux

Principe de l'impédancemétrie (comptage basé sur la variation de conductivité)
Diffusion de la lumière (FSC, SSC) en cytométrie optique
Marquage des cellules avec anticorps fluorescents
Composition d'un cytomètre en flux (lasers, filtres, photomultiplicateurs)
Paramètres mesurés par l'automate NFS : GR, GB, plaquettes, indices
Affichage graphique : histogrammes, dot plots, flags d'alerte
Différences entre analyse quantitative (NFS) et phénotypique (CMF)

Identifier les pièges dans l'analyse d'un automate à nfs ou d'un cytomètre en flux

Causes d'erreurs pré-analytiques : échantillons hémolysés, coagulum, délai
Interférences biologiques : leucocytose, cryoglobulinémie, microcytose sévère
Fausse thrombopénie par agrégation plaquettaire
Flags suspects non spécifiques en NFS automatisée
Faux positifs ou faux négatifs en cytométrie (mauvais marquage, compensation)
Importance du frottis sanguin dans la validation manuelle

Citer les principes généraux de la classification des hémopathies

Les principales hémopathies myéloïdes et lymphoïdes
Les grands principes de la classification des hémopathies
La classifciation OMS 2022

Énumérer les principaux phénotypes normaux et anormaux des cellules hématopoïétiques

Phénotype des cellules souches hématopoïétiques : CD34+, CD117+
Marqueurs des lignées myéloïdes : CD13, CD33, MPO
Marqueurs des lymphocytes B : CD19, CD20, CD10
Marqueurs des lymphocytes T : CD3, CD4, CD8
Marqueurs NK : CD16, CD56
Phénotypes anormaux : co-expression inhabituelle, absence de marqueurs attendus
Utilisation des panels d'anticorps standards selon les pathologies suspectées

Définir les principes d'analyse en cytogénétique et biologie moléculaire et leurs avantages, limites et place dans le diagnostic des hémopathies

Principe du caryotype conventionnel sur moelle osseuse
Techniques FISH ciblant des anomalies spécifiques (ex. BCR-ABL, PML-RARA)
RT-PCR pour la détection des transcrits de fusion
NGS pour le séquençage de panels de gènes impliqués dans les hémopathies
Sensibilité et spécificité comparées des différentes techniques
Délai de rendu des résultats et contraintes logistiques
Intégration des résultats dans les classifications OMS/ELN

Identifier les principales anomalies chromosomiques et moléculaires recherchées en hématologie

Anomalies récurrentes des leucémies aiguës : t(8;21), t(15;17), inv(16)
Translocation t(9;22) dans la LMC et certaines LAL
Mutations fréquentes : NPM1, FLT3, DNMT3A, JAK2, TET2, ASXL1
Délétions ou trisomies caractéristiques des syndromes myélodysplasiques
Intérêt pronostique et/ou thérapeutique des anomalies détectées

Citer les avantages et limites de ces différentes méthodes

CMF : rapide, sensible, mais dépend du panel et de l'expertise
RT-PCR : excellente sensibilité mais limitée aux anomalies connues
NGS : vision globale mais délai et coût plus élevés
Accès variable aux technologies selon les établissements

Identifier les avantages, limites et place de la cmf dans le diagnostic des hémopathies

Capacité à analyser rapidement des milliers de cellules
Identification fine des populations anormales par marquage multi-antigène
Sensibilité dans le diagnostic des leucémies et lymphomes
Surveillance de la maladie résiduelle
Dépendance à l'expertise pour l'analyse et l'interprétation
Limites techniques : chevauchement des signaux, variabilité inter-laboratoires
Complémentarité avec la biologie moléculaire et la cytogénétique

Interpréter un immunophénotypage à l'aide d'exemples

Lecture des histogrammes : dot plots, histogrammes, diagrammes biaxiaux
Gating successif pour identifier les sous-populations cellulaires
Analyse de cas types : LAL B, LAL T, LAM, LLC, LNH B
Corrélation avec les données cliniques, NFS, cytologie
Reconnaissance des phénotypes aberrants dans les leucémies

Définir la maladie résiduelle

Définition : persistance de cellules leucémiques après traitement en rémission
Concept de seuil de détection inférieur au microscope
Importance pronostique dans les leucémies aiguës
Recommandations internationales (ELN, GRAALL) sur l'usage de la MRD
Impact sur les décisions thérapeutiques (greffe, intensification)

Différencier les principales méthodes d'évaluation de la maladie résiduelle

Cytométrie en flux vs RT-PCR vs NGS
Choix de la méthode selon la pathologie, le gène cible et la disponibilité
Importance de la reproductibilité inter-laboratoires

Méthodes pédagogiques

Alternance de méthodes pédagogiques variées, adaptées aux différentes compétences à acquérir. Des cours magistraux permettront aux stagiaires d'acquérir les connaissances théoriques nécessaires, tandis que des travaux pratiques leur permettront de se familiariser avec les techniques d'analyse et de diagnostic. Des études de cas seront également proposées, afin d'encourager les stagiaires à développer leur esprit d'analyse et de synthèse.

Modalités d'évaluation

Une évaluation formative sera réalisée tout au long du programme afin de permettre aux formateurs de fournir un retour régulier aux participants et de les aider à progresser dans leur apprentissage. Elle pourra prendre la forme d'exercices pratiques, de discussions de groupe ou de QCM.

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